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HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)說明書

簡要描述:

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更新時(shí)間:2018-10-29

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HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)說明書

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HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)說明書

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HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)說明書細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MDA231全細(xì)胞裂解液100ug100ug

Du145全細(xì)胞裂解液100ug100ug

NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞)櫟迷孔菌

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae紫色變異鏈霉菌 Streptomyces violovariabilis

木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)銹球菌 Sparassis crispa

WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞)Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

無花果曲霉 Aspergillus ficuum醬油曲霉

蘋果黑腐皮殼BABL/C小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)說明書0.156-10 ng/mL人E3泛素蛋白連接酶AMFR (E3 ubiquitin-protein ligase AMFR)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human E3 ubiquitin-protein ligase AMFR

1.56-100 U/L人解整合素樣金屬蛋白酶28(ADAM 28)ELISA試劑盒

1.56-100 U/LELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 28

0.312-20 ng/mL人血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白金屬蛋白酶6(ADAM-TS 6)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 6

0.156-10 ng/mL人解整合素樣金屬蛋白酶12(ADAM 12)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 12
HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)說明書細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

 
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